Þættirnir sem ákvarða skilvirkni DNA nýmyndunar

Í dæmigerðri myndun DNA, RNA og ónáttúrulegra kjarnsýra gegnir afverndunar- og tengingarskrefið mikilvægu hlutverki.

Afverndunarskrefið er að fjarlægja DMT hópinn á föstum burðarefninu eða 5' hýdroxýlhópinn á fyrri núkleósíðinu með lífrænni sýru og afhjúpa hýdroxýlhópinn fyrir eftirfarandi tengiskref.3% tríklórediksýran í díklórmetani eða tólúeni er aðallega notuð til að framkvæma afverndunarskrefið.Styrkur tríklórediksýru og afverndunartími (afblokkunartími) ráða yfir hreinleika lokaafurðanna.Lágur styrkur og ófullnægjandi afblokkunartími skilur eftir óhvarfað DMT hóp, sem minnkar uppskeruna og eykur óæskileg óhreinindi.Langur afblokkunartími getur leitt til afpúríns í tilbúnum röðum og myndar óvænt óhreinindi.

Tengingarskrefið er viðkvæmt fyrir vatnsinnihaldi leysiefna og raka í loftinu.Styrkur vatns í myndun ætti að vera minni en 40 ppm, betur minna en 25 ppm.Til að viðhalda ástandi vatnsfrís myndunar ætti myndun kjarnsýranna að fara fram í umhverfi með lágum raka, svo við mælum með því að viðskiptavinir okkar notiAmidites uppleyst búnaður, sem getur leyst upp duftformað eða olíukennt fosfóramidít í vatnsfríu asetónítríl til að forðast snertingu við loft.

Þættirnir sem ákvarða skilvirkni DNA myndunar5
Þættirnir sem ákvarða skilvirkni DNA myndunar4

Þar sem fosfóramidít er leyst upp er það betra við aðstæður án vatns og sameindagildrur til að gleypa snefilvatnið í hvarfefnin og amíðið, það þarf að undirbúaSameindagildrur.Við mælum með 2 g sigti fyrir 50-250ml hvarfefnisflöskur, 5g fyrir 250-500ml hvarfefnisflöskur, 10g fyrir 500-1000ml hvarfefnisflöskur og 20g fyrir 1000-2000ml hvarfefnisflöskur.

Leysið á fosfóramíðítum ætti að fara fram undir óvirku andrúmsloftinu og að skipta um virkjara hvarfefna og asetónítríls ætti að vera lokið tímanlega.Nota skal lokunar- og oxunarhvarfefnin eins fljótt og auðið er, opnuðu hvarfefnin gefa minna geymsluþol og minni virkni meðan á myndun stendur.


Pósttími: Ágúst-09-2022